그의
그의 태그는 가장 인기 있는 단백질 태그 중 하나입니다. His6는 관심 단백질의 C-말단 또는 N-말단에 삽입될 수 있는 6개의 히스티딘 잔기로 구성된 융합 태그를 의미한다. 태그를 사용하면 정제 및 검출을 용이하게 하는 에피토프를 구성할 수 있습니다. 다른 하나는 정제를 용이하게 하는 독특한 구조적 특징(결합 리간드)을 구성하는 것입니다. 히스티딘 잔기의 측쇄는 고체 니켈과 강한 인력을 가지고 있어 고정화 금속 킬레이트 크로마토그래피(IMAC)에 사용되어 재조합 단백질을 분리 및 정제할 수 있습니다.
플래그 태그
FLAG 태그 단백질은 8개의 아미노산을 암호화하는 친수성 폴리펩타이드(DYKDDDDK)이며 벡터에 구축된 Kozak 서열은 진핵 발현 시스템에서 FLAG와 융합 단백질을 보다 효율적으로 만듭니다 프로틴그래놀라.
아비태그
15개의 아미노산으로 이루어진 짧은 펩타이드로서 하나의 비오티닐화 라이신 부위를 가지고 있으며, 알려진 천연 비오티닐화 서열과는 완전히 다르며 표적 단백질의 N-말단과 C-말단에 추가될 수 있습니다. 융합 발현 후, 비오틴 리가제에 의해 비오티닐화될 수 있습니다. 재조합 단백질을 정제하기 위해 친화도가 낮은 단량체 아비딘 또는 아비딘 유도체를 선택하여 단백질 분리 및 정제 및 단백질 상호작용 연구에 사용합니다.
SNAP 태그
SNAP-태그는 인간 O6-메틸구아닌-DNA 메틸 전이(O6-alkylguanine-DNA-alkyltransferase)로부터 얻었다. SNAP의 활성 티올 부위는 페닐메틸구아닌이 운반하는 측쇄 페닐기를 받아들이고 구아닌을 방출합니다. 이 새로운 티오에테르 결합의 공유 결합은 SNAP에 의해 운반되는 표적 단백질이 페닐메틸 그룹에 의해 운반되는 표지를 운반할 수 있게 합니다.
정제되거나 정제되지 않은 SNAP-Tag 융합 단백질을 표면에 페닐메틸구아닌으로 고정된 매트릭스와 혼합함으로써 단백질은 기질과 특이적으로 상호작용하고 공유 결합을 형성할 수 있습니다. 융합 단백질은 매트릭스 표면에 간접적으로 고정되어 단백질 기능 또는 단백질 정제 에 대한 보다 편리하고 신속한 연구를 달성할 수 있습니다 .
GST(글루타티온 티올트랜스퍼라제)
GST-tagged 단백질 자체는 해독에 중요한 역할을 하는 전이효소(transferase)로 본래의 크기는 26kD이다. GST 융합 발현 시스템은 대장균 및 효모와 같은 숙주 세포에서 발현될 수 있는 다양한 융합 단백질의 발현을 위해 널리 사용된다. 결합된 융합 단백질은 자연 조건 하에서 10mM 환원된 글루타티온으로 용출되었습니다. GST 태그는 효소 분석 또는 면역 분석으로 편리하게 검출할 수 있습니다. 태그는 세포외 프로테아제에 의한 분해로부터 재조합 단백질을 보호하고 안정성을 향상시키는 데 도움이 됩니다.
GFP
GFP (녹색 형광 단백질)는 Hamamura 등에 의해 해파리에서 발견되었습니다. 청색 파장 범위의 빛에 의해 여기되면 녹색 형광을 발산합니다. GFP 태그는 단백질의 C-말단 또는 N-말단에 위치할 수 있으며, 이 시스템은 박테리아, 효모 및 포유류 세포를 포함한 다양한 세포 유형에서 널리 사용되었으며 해당 GFP 태그 항체도 광대하게 사용 된. GFP는 단백질 발현, 단백질 및 세포 형광 추적, 단백질 상호 작용 및 구조적 변화의 연구에서 중요한 역할을 합니다.